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克隆副作用留神事项
发布人:viking2000    看下 2462 次    时间:2012年12月19日    
  1. 引物不能磷酸化。
  2. 对于TA克隆,引物5’端榜首个碱基最好是使用G/C。   
    TA 克隆,只能用Taq系列的酶;平端克隆,使用产平生端的酶。  
  3. PCR 产品若有杂带,凝胶收买,但不必在UV 下流露时间太长,较长时刻损伤DNA,影响克隆效率。  
  4. 遵照PCR 产品的能力,增减PCR 产品的量(0.5-4μl),但是载体运用量稳定。  
  5. 副作用温度不能不及20℃。  
  6. 副作用时间一定不能超过30分钟。  
  7. 总副作用体积不能超过5μl。  
  8. 这些年来克隆片断的增加(>3 kb),克隆效率避免
,
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发布人:viking2000 发布时间:2012年12月19日已被看下 2462
 
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